Parámetros Cinéticos de la Fosfatasa Alcalina

Material – Procedimiento – Método

Materiales

  • Espectofotómetro a  de 405nm. 
  • Baño María. 
  • Guantes. 
  • Pipetas. 
  • Tubos de ensayo. 
  • Gradilla para los tubos.
  •  Fotoceldas para el Espectofotómetro. 
  • Reactivos 
  • Extracto enzimático de intestino de rata. 
  • Bukker 
  • Sustrato: P-nitrofenil fosfato 
  • Producto: P-nitrofenol 
  • NaOH 
  • Inhibidor 

Diagrama de Flujo:

Parámetros cinéticos de la fosfatasa alcalina

Parámetros cinéticos de la fosfatasa alcalina

Resultados

1. Efecto de la Variación de la Concentración del Sustrato sobre la Velocidad Enzimática

representación de michaelis menten

Gráfica nº 1: representación de michaelis menten. Efecto de la concentración de sustrato (p-nitrofenil fosfato) sobre la velocidad de reacción  de la fosfatasa alcalina. V vs [s].

efecto de la concentración de sustrato sobre la velocidad de reacción de la fosfatasa alcalina

Gráfica nº2: efecto de la concentración de sustrato sobre la velocidad de reacción de la fosfatasa alcalina. 1/v vs 1/ [s].

efecto de la inhibición sobre la actividad enzimática

Gráfica nº 3: efecto de la inhibición sobre la actividad enzimática

inhibición sobre la actividad enzimática

inhibición sobre la actividad enzimática

2. Efecto de la Inhibición del Fosfato Inorgánico sobre la Actividad Enzimática

Inhibición del Fosfato Inorgánico

A partir de los datos obtenidos y los cálculos realizados, construir la gráfica 1/V vs 1/ [s].

Parámetros cinéticos de la fosfatasa alcalina